目的: 观察体外培养人眼脉络膜黑色素细胞是否产生基质金属蛋白酶-2,以研究近视相关因子(转化生长因子β2)是否调控这种表达。
方法: 用细胞角蛋白抗体、S-100抗体进行细胞免疫组化染色以鉴定脉络膜黑色素细胞;用Western印迹法从蛋白表达水平定量检测脉络膜黑色素细胞的基质金属蛋白酶-2表达及转化生长因子β2对表达的影响,并用免疫荧光组化技术进行定位。
结果: 成功体外培养了脉络膜黑色素细胞;使用等量总蛋白进行Western印迹法分析,用基质金属蛋白酶-2抗体检测发现:正常脉络膜黑色素细胞样本有微弱的信号条带,转化生长因子β2处理的样本有清晰的信号条带;免疫荧光组化显示基质金属蛋白酶-2反应产物位于细胞浆,且细胞核周围密集。
结论: 体外培养的人眼脉络膜黑色素细胞低水平表达基质金属蛋白酶-2,转化生长因子β2上调基质金属蛋白酶-2的表达。 |