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甲状腺相关眼病眼眶前脂肪细胞培养和生长曲线的测定 |
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| 甲状腺相关眼病眼眶前脂肪细胞培养和生长曲线的测定 |
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作者：罗清礼、… 文章来源：四川大学华西医院眼科 点击数：2012 更新时间：2005/6/15 23:45:51 
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| 摘要 目的 眶脂肪组织增多在甲状腺相关眼病（TAO）中起重要作用，在体外用实验的方法培养前脂肪细胞，并诱导其转化为脂肪细胞，为进一步研究TAO奠定基础。方法 眼眶脂肪组织和眼外肌从严重TAO病人眼眶减压和眼球摘除术中获得，正常人的眼眶脂肪组织和眼外肌从意外死亡者中获得，培养的前脂肪细胞和成纤维细胞，用单克隆抗体vimitin, desmin, S-100, myolobin,CK,SMA染色，电镜检查进行鉴定，并测定生长曲线，再加入不同浓度的诱导液3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）、胰岛素和地塞米松，诱导出的脂肪细胞，用苏丹3和油红O染色进行鉴定，检测脂肪细胞转化率，测定脂肪细胞的脂肪含量。结果 眼眶前脂肪细胞与成纤维细胞在体外培养较易生长，生长速度基本接近。相差显微观察，培养与成纤维细胞均呈梭形或多角形，vimitin染色阳性，desmin, S-100, myolobin,CK,SMA表达阴性。超微结构检查无明显差异，生长曲线基本相同，呈近“S”型。培养的前脂肪细胞加入诱导液后，5-7天细胞由梭形变成短圆形，出现脂滴，2周时脂滴增多，3周时脂滴扩大融合，3-4周时部分脂滴溢出细胞，悬浮于培养液中，苏丹3将脂滴染成桔黄色，油红O将脂滴染成红色。眼外肌与结缔组织来源的成纤维细胞不能诱导出脂肪细胞。胰岛素10µg/ml、地塞米松1µmol/l、IBMX 0.25mmol/l诱导作用最强。结论 体外成功地培养出眼眶前脂肪细胞与成纤维细胞，光、电镜检查其形态学无明显差异，vimitin染色阳性，诱导液诱导的眼眶前脂肪细胞转化为脂肪细胞有一定的剂量依赖性，国内首次成功培养眼眶前脂肪细胞并诱导转化成脂肪细胞为进一步探讨TAO的发病机理奠定基础。 |
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| 会议投稿录入：yangguangy 责任编辑：毛进 |
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